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六味五灵片

六味五灵片对小鼠免疫功能的影响
作者: 管理员 来源:本网站 更新日期:2006/7/4 阅读次数:1351
 1 .对免疫性肝损伤的影响 健康小鼠 60 只,随机分为六组,正常对照组、模型组、护肝片组( 0.8g /kg )、六味五灵片(8 、 4 、 2g /kg)三个剂量组,每组 10 只,小鼠灌胃给药(ig )给药 2 次 / 日,共 10 天。给药前除正常对照组外,每鼠尾静脉注射 0.25% 卡介苗( BCG ) 2.5mg ), 10 天后每鼠再尾静脉注射脂多糖( LPS ) 2.5 μg 攻击, 12 小时后眼球后静脉从取血测血清 ALT 、 AST 。结果见表 4 。
 
表 4 六味五灵片对小鼠免疫性肝损伤的影响( X ± SD )
组别
剂量
动物数
ALT
AST

g/kg

( 只 )
(чmol/s)/L
(чmol/s)/L
对照组
10
181.20 ± 11.70
412.00 ± 16.36
模型组
10
764.40 ± 33.74
1021.6 ± 29.35
六味五灵片
0.8
10
422.40 ± 33.29
716.8 ± 28.88
4
10
478.00 ± 28.99
781.60 ± 29.38
1
10
542.00 ± 23.52
796.40 ± 28.22

与模型组相比, * p < 0.05 ** p < 0.01 与对照组相比 ## p < 0.01
 
结果表明,六味五灵片对卡介苗( BCG )加脂多糖( LPS )所致免疫性肝损伤小鼠血清转氨酶的升高有明显的抑制作用,与模型组相比有显著性差异。

2 .对小鼠单核巨噬功能的影响 [5] 小鼠碳粒廓清法:小鼠随机分为六组,正常组、阳性对照组药左旋米唑、护肝片组、六味五灵片( 8 、 4 、 2g/kg )三个剂量组,每组 10 只,灌胃( ig )给药,每次 0.5ml/ 只,每天 2 次,对照组同法给蒸馏水,连续一周。末次药后称取体重,尾静脉流射印度墨汁稀释液 0.1ml/ 10g , 注射后 1 分钟、 5 分钟用玻毛细吸管分别从眶后静脉丛取血 20 μl, 溶于 3ml0.1NaHCO 3 溶液中摇匀,置分光光度计在波长 650mm 下比色,测定光密度值( OD )。最后将小鼠颈椎脱臼处死,分别称取肝、脾重量。按公式计算廓清指数 K 或校正廓清指数α,进行组间 t 试验。
 
K =
LogOD1- LogOD2
————————
T2 - T1
α
体重
———————
肝重+脾重
× 3

 
表 5 六味五灵片对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响( X ± SD )
组别
剂量
动物数
K 值
α值

g/kg

( 只 )
(чmol/s)/L
(чmol/s)/L
对照组
0.8
10
0.036 ± 0.016
6.43 ± 1.53
护肝片
1.09
10
0.54 ± 0.017
6.82 ± 1.09
六味五灵片
8
10
0.053 ± 0.017
7.61 ± 0.85
4
10
0.053 ± 0.019
7.17 ± 0.79
2
10
0.045 ± 0.010
6.73 ± 0.91
左旋咪唑
0.04
10
0.064 ± 0.022
7.77 ± 0.90

与对照组相比, * p < 0.05 ** p < 0.01
由表 5 结果可见,六味五灵片片高、中剂量组对廓清指数 K 值比对照组有显著性提高,提示六味五灵片对网状内皮系统有一定的激活作用。
 
3 .对小鼠溶血素抗体生成的影响 [6] 取健康小鼠,按体得随机分七组,正常对照组、环磷酰胺对照组、阳性对照药左旋米唑组、护肝片组、六味五灵片( 8 、 4 、 2g /kg )三个剂量组,每组 10 只。每日灌胃( ig )给药 2 次(正常对照组灌胃给予相同体积的蒸馏水),连续 9 天,药后第五天,每鼠腹腔注射( ip ) 3:5(V/V) 稀释的绵关红细胞( SRBC )悬液 0.2ml/只 进行免疫,一小时后,除正常对照组外,各组小鼠腹腔注射( ip )环磷酰胺 15mg/kg 体重( 0.2ml/20g ),次日再以同剂量注射一次。免疫四天后摘除小鼠眼球取血 1ml ,分离血清,用生理盐水将血清稀释 500 倍,取 1ml 稀释血清加入 10%0.5ml SRBC ,置冰浴中,每管加入 1ml 以生理盐水 1:10 稀释过的豚鼠血清,随即移至 37 °恒温水浴中,保温 10 分钟,即放入冰浴以终止反应,用 2000r/min 离心 10min ,取上清 1ml, 加 3ml 都氏试剂混匀,放置 10 分钟后,用分光光度计在 540nm 下测定各样品的吸收度值,并计算半数溶血值( HC50 )。
 
HC50 =
样品的吸收度值
—————————————————
羊红细胞半数溶血时吸收度值
×稀释倍数


 
表6 六味五灵片对小鼠溶血素抗体生成的影响
组别
剂量
动物数
ALT

g/kg

( 只 )
(чmol/s)/L
对照组
 
10
122.76 ± 23.45
环磷酰胺
 
10
25.21 ± 14.26
护肝片
0.8
10
44.23 ± 24.78
六味五灵片
8
10
83.44 ± 26.68
4
10
68.86 ± 21.04
2
10
44.34 ± 20.41
左旋咪唑
0.04
10
74.14 ± 20.41
 
结果见表6, 六味五灵片能明显增加小鼠血清溶血含量,对环磷酰胺所致免疫抑制,有较强拮抗作用。

4 .对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响 取雄性小鼠,随机分成六组,对照组、护肝片( 0.8gg/kg )左旋咪唑组、六味五灵片( 8 、 4 、 2g /kg )一个剂量组,每组 10 只。每鼠每日肌肉注射植物血凝素( PHA ) 8mg/kg ,共 3 天,给药组在给 PHA 当天开始灌胃( ig )等体积不等浓度的不同药液,正常对照组 ig 相同体积的蒸馏水,每天给药 2 次,连续 9 天,第 9 天剪尾,取血推片,瑞氏染色,油镜下计数 100 个淋巴细胞中淋巴母细胞及过渡态细胞数,计算它们分别占得百分率。

表 7 六味五灵片对小鼠淋巴细胞转化的影响( X ± SD )
组别
剂量
动物数
淋巴母细胞
过渡态细胞

g/kg

( 只 )
( % )
( % )
对照组
 
10
15.9 ± 7.8
28.1 ± 8.2
护肝片组
0.8
10
25.4 ± 8.5
34.2 ± 8.3
六味五灵片
8
10
26.3 ± 0.8
35.7 ± 7.6
4
10
23.1 ± 6.9
32.9 ± 8.0
2
10
22.0 ± 5.2
33.3 ± 6.4
左旋咪唑
0.04
10
31.7 ± 6.9
36.3 ± 87.9
 
结果:肝得定片高、中剂量可使小鼠对植物血凝素( PHA )刺激的转化反应增强,淋巴母细胞百分率与对照组有显著提高,说明六味五灵片能提高淋巴细胞的转化程度,提高 T 细胞免疫功能。 
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